Сделай Сам Свою Работу на 5

Белки - ингибиторы ферментов

Они ингибируют действие протеолитических ферментов (протеиназ). В настоящее время хорошо изу­чены: a1-анти­три­п­син, a2-макроглобулин, ин­тер-a-трипсиновый ингибитор. Они ингибируют многие фер­менты сверты­ва­ния крови, а также трипсин и химотрипсин. Считают, что a1- антитрипсин может играть защитную роль, ингибируя протеиназы, поступающие в кровь в результате лизиса клеток; он также по­давляет подвижность сперматозоидов в половых путях, эластазу нейтрофилов. Недостаток этого ингиби­тора приво­дит к развитию воспаления в зоне очага.

Белки острой фазы

Это группа белков плазмы, содержание которых увеличивается в ответ на повреждение ткани, воспале­ние, опухо­левый процесс. Эти белки синтези-ру­ются в печени и являются гликопротеинами. К белкам ост­рой фазы отно­сятся:

- гаптоглобин (увеличивается в 2-3 раза, особенно при раке, ожо­гах, хирургических вмеша­тельствах, воспалении);

- церулоплазмин (имеет значение как антиоксидант);

- трансферрин (содержание снижается);

- С-реактивный белок. Отсутствует в сыворотке здорового человека, но обнаруживается при патологи­ческих состояниях, сопровождающихся некро­зом (острая фаза ревматизма, инфаркт миокарда и др.). Предполагается, что он способствует фагоцитозу.

- интерферон - специфический белок, появляющийся в клетках в резуль­тате проникновения в них ви­русов. Он угнетает размножение вирусов в клет­ках. Обладает видовой специфичностью, но не абсолют­ной.

- фибриноген, основная функция которого участие в свертывании крови. Синтез фибриногена начина­ется через несколько часов после травмы с мак­симумом на конец 1-2 суток.

Остаточный (небелковый) азот

Это азот вещетв, остающихся в плазме после осаждения белков. Компонентами остаточного азота являются:

мочевина – 50%,

аминокислоты – 25%,

мочевая кислота – 4%,

креатин – 5%

креатинин – 2,5% и другие азотсодержащие вещества.

Повышение остаточного азота в крови называется гиперазотемией. Гиперазотемия бывает продукционная и ретенционная.



Продукционная гиперазотемия возникает при избыточном поступлении азотсодержащих продуктов в кровь (при обширных воспалениях, деструкции тканей, ожогах, кишечной непроходимости и т.д.). При этом возрастают немочевинные фракции остаточного азота.

Ретенционная гиперазотемия бывает в результате недостаточного выделения компонентов остаточного азота с мочой при нормальном их поступлении в кровь.

Различают почечную и внепочечную ретенционную гиперазотемию.

Почечная азотемия возникает вследствие ослабления экскреторной функции почек, в основном, за счет мочевины при нефритах, туберкулезе почек и др.

Внепочечная азотемия возникает при тяжелой сердечнососудистой недостаточности, гипотонии, шоке, наличии препятствий оттоку мочи.

План изучения темы

Исходный уровень знаний

- Строение белков. Классификация белков по форме молекул.

- Обмен веществ.

2.2. Вопросы для самостоятельной подготовки к занятию

- функции белков плазмы крови;

- альбумины, место синтеза, свойства, функции;

- причины гипоальбуминемии;

- глобулины, фракции, функции, гиперпротеинемия.

- белки-ферменты плазмы крови;

- характеристика отдельных белков плазмы крови (гаптоглобин,

гемопексин, церулоплазмин, трансферрин, белки-ингибиторы ферментов);

- белки острой фазы;

- остаточный азот;

- компоненты остаточного азота и их происхождение;

- гиперазотемия, виды гиперазотемий;

- взаимосвязь обменов;

- хромопротеины. Классификация. Роль хромопротеинов;

- гемоглобин, строение, значение;

- синтез и распад гемоглобина;

- формы билирубина и их значения для диагностики;

- желтухи.

Лабораторная работа. Определение билирубина в сыворотке крови

Оборудование: 1. Штатив с пробирками.
  2. Пипетки на 1 мл и 2 мл.
  3. КФК.
  4. Кюветы на 0,5 см.
     
Реактивы: 1. Кофеиновый реактив.
  2. Физиологический раствор.
  3. Диазореактив.
  4. Сыворотка крови.

 

Принцип метода. Связанный билирубин при взаимодействии с диазореактивом (диазофенилсульфоновая кислота) образует розовое окрашивание, интенсивность которого пропорциональна концентрации билирубина, вступающего в прямую реакцию. Кофеиновый реактив переводит несвязанный билирубин в растворимое состояние, благодаря чему он также реагирует с диазореактивом, образуя розовое окрашивание. По интенсивности этого суммарного окрашивания определяют концентрацию общего билирубина. А концентрацию не связанного билирубина определяют как разность между общим и связанным билирубином.

Ход работы. В 3 пробирки приливают реактивы по схеме:

 

Реактивы (мл) Общий билирубин Связанный билирубин Контрольная проба
Сыворотка 0,5 0,5 0,5
Кофеиновый реактив 1,75 - 1,75
Физиологический раствор - 1,75 0,25
Диазореактив 0,25 0,25 -

Через 5-10 мин после прибавления диазореактива колориметрируют пробу на связанный билирубин (при более длительном стоянии пробы в реакцию вступает несвязанный билирубин, что искажает результат). Пробу на общий билирубин колориметрируют через 20 мин после добавления диазореактива. Колориметрирование проводят при зеленом светофильтре в кювете толщиной 0,5см против контроля. Концентрацию общего и связанного билирубина определяют по калибровочному графику.

Нормальное содержание билирубина в сыворотке: общий – 1,7-20,5 ммоль/л, связанный – 0,86-4,3 мкмоль/л, свободный – 1,7-17,1 мкмоль/л.

Диагностическое значение определения билирубина сыворотки крови

Причины, вызывающие гипербилирубинемию, различны. Желтуха появляется, когда уровень билирубина в крови превышает 43 мкмоль/л. Заболевания, вызывающие повышение связанного билирубина: вирусный гепатит, цирроз печени, опухоль печени и метастазы, жировая дистрофия.

Заболевания, вызывающие повышение несвязанного билирубина: гемолитическая анемия, пернициозная анемия, желтуха новорожденных.

Защита лабораторной работы

а) Вопросы для защиты лабораторной работы

1. Объясните термины: общий билирубин, свободный билирубин, связанный билирубин, прямой билирубин, непрямой билирубин, конъюгированный билирубин, некоъюгированный билирубин.

2. Как образуется свободный билирубин?

3. Зачем в данном методе используется кофеиновый реактив?

4. Почему пробу на связанный билирубин колориметрируют точно через 5-10 минут?

5. Каков принцип метода определения билирубина в сыворотке крови?

6. Как определяют концентрацию общего и связанного билирубина?

7. Назовите причины гипербилирубинемии.

8. Какова норма свободного, связанного и общего билирубина?

б) Ситуационные задачи

1. У новорожденного через 3 дня после рождения появилась желтуха. Общий билирубин крови в крови - 30 мкмоль/л, непрямой - 27 мкмоль/л. Через 2 недели желтуха исчезла. Назовите вид желтухи?

2. Заполните в тетради следующую таблицу:

Показатель Вид желтухи
Механическая Паренхиматозная Гемолитическая
I. Кровь:      
Общий билирубин      
Прямой билирубин      
непрямой билирубин      
II. Моча:      
билирубин      
уробилиноген      
III. Кал:      
стеркобилиноген      

 

Примечание: В пустых графах поставьте обозначения: Н - норма,

­ - повышено, ¯ - понижено, «+» - определяется, «0» - не определяется.

3. У больного 43 лет, через 2 дня после подъема температуры до 38оС появилось желтушное окрашивание кожи и слизистых, моча потемнела, кал обесцветился. В крови уровень общего билирубина - 40 мкмоль/л, прямого 15 мкмоль/л. В моче обнаруживается уробилин и билирубин. Какой вид желтухи вы предполагаете?

4. Больной жалуется на сильные боли в правом подреберье. Отмечается желтушность кожи и слизистых, зуд кожных покровов. Моча темная, кал обесцвеченный. В крови уровень общего билирубина 55 мкмоль/л, прямого - 40 мкмоль/л. В моче определяется билирубин. Вид желтухи? Активность каких ферментов поможет в диагностике заболевания?

5. У больного после переливания крови появилось желтушное окрашивание кожи и слизистых. Какой вид желтухи можно предположить? Как изменятся показатели пигментного обмена в крови и моче?

6. У новорожденного сразу после рождения обнаружилась желтуха. Общий билирубин в крови - 60 мкмоль/л, непрямой - 53 мкмоль/л. Какой вид желтухи можно предположить?

 



©2015- 2019 stydopedia.ru Все материалы защищены законодательством РФ.