Опыт № 3 Осаждение белков концентрированными минеральными (неорганическими) кислотами

ГБПОУ «Самарский медицинский колледж им. Н.Ляпиной»

Лабораторный практикум

дисциплина «БИОХИМИЯ»

Специальность 33.02.01 «Фармация»

Студент:______________________

Группа №_____________________

Преподаватель: _______________

Самара – 2015

Пояснительная записка

Изучение курса биохимии направлено на формирование представлений о химической природе, превращении веществ, входящих в состав организма человека, животных и растений.

Лабораторный практикум по биохимии предназначен для использования при изучении дисциплины «БИОХИМИЯ» в учебных заведениях среднего профессионального образования в рамках специальности 33.02.01 «Фармация», включает работы, охватывающие основные разделы теоретического курса биохимии Данный практикум поможет обучающимся более глубоко понять темы: «Химия белков», «Химия углеводов», «Химия липидов».

В практикуме имеются свободные строки для внесения наблюдений и выводов, написания уравнений химических реакций, таблицы для заполнения.

Методы исследования, изложенные в пособии, могут стать основой для последующей научно-исследовательской работы, подготовки курсовых и дипломных проектов.

Практическая работа № 1 «Химия белков»

Опыт № 1 Биуретовая реакция на пептидную связь

Материалы и оборудование:яичный белок, 1% раствор (белок куриного яйца фильтруют через марлю и разводят дистиллированной водой 1:10); гидроксид натрия – NaOH, 10 % раствор; сульфат меди (II) – CuSO₄, 1 % раствор; штатив с пробирками, пипетка.

Ход работы

1. В пробирку вносят 5 капель раствора яичного белка, 3 капли раствора гидроксида натрия и 1 каплю сульфата меди (II).

2. Перемешивают.

Наблюдения:_________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Вывод: ______________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Опыт № 2 Нингидриновая реакция

Материалы и оборудование:яичный белок, 1% раствор; нингидрин, 0,5 % водный раствор; штатив с пробирками, пипетка, водяная баня, электроплитка, пробиркодержатель.

Ход работы

1. В пробирку вносят 5 капель раствора яичного белка, добавляют 5 капель раствора нингидрина.

2. Нагревают до кипения.

Наблюдения:_________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Вывод: ______________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Опыт № 3 Ксантопротеиновая реакция

Материалы и оборудование:яичный белок, 1% раствор; концентрированная азотная кислота – HNO₃; гидроксид натрия – NaOH, 10 % раствор; штатив с пробирками, пипетка, водяная баня, электроплитка, пробиркодержатель.

Ход работы

1.К 5 каплям раствора яичного белка добавляют 3 капли концентрированной азотной кислоты.

2. Осторожно нагревают!!!

3. После охлаждения добавляют (желательно на осадок) 10 капель раствора гидроксида натрия.

Наблюдения:_________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Вывод: ______________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Опыт № 4 Реакция Адамкевича

Материалы и оборудование: неразбавленныйяичный белок; концентрированная ледяная уксусная кислота – СH₃COOH; концентрированная серная кислота – H₂SO₄; штатив с пробирками, пипетка.

Ход работы

1. К 1 капле яичного белка осторожно прибавляют 10 капель концентрированной уксусной кислоты.

2. Наклонив пробирку, осторожно по стенке добавляют по каплям 0,5 мл концентрированной серной кислоты, так, чтобы жидкости не смешивались.

3. Некоторое время ожидают результата.

Наблюдения:_________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Вывод: ______________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Опыт № 5 Реакция Фоля

Материалы и оборудование:яичный белок, 1% раствор; реактив Фоля (к 5 % раствору ацетата свинца прибавляют равный объем 30 % раствора гидроксида натрия – NaOH до растворения образовавшегося осадка); штатив с пробирками, пипетка.

Ход работы

1. К 5 каплям яичного белка прибавляют 5 капель реактива Фоля.

2. Кипятят 2-3 минуты.

3. Некоторое время ожидают результата.

Наблюдения:_________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Вывод: ______________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Заполните таблицу:

Название реакции	Реактивы	Наблюдаемое окрашивание	Группы, открываемые в белке

Практическая работа №2 «Обратимое и необратимое осаждение белков»

Обратимое осаждение

Опыт № 1 Высаливание белков

Материалы и оборудование:неразведенныйяичный белок; насыщенный раствор сульфата аммония – (NH₄)₂SO₄; гидроксид натрия – NaOH, 10 % раствор; сульфат аммония в порошке – (NH₄)₂SO₄; дистиллированная вода; штатив с пробирками, пипетка.

Ход работы

1. В пробирку наливают30 капель неразведенного яичного белка.

2. Добавляют равное количество насыщенного раствора сульфата аммония.

3. Перемешивают.

4. Через 5 минут осадок отфильтровывают.

5. Осадок с фильтра снимают стеклянной палочкой и переносят в пробирку.

6. Добавляют 5 капель дистиллированной воды.

7. Проводят биуретовую реакцию.

8. В пробирку с фильтратом добавляют порошок сульфата аммония до полного насыщения раствора.

9. Образовавшийся осадок отфильтровывают, растворяют.

10. Проводят биуретовую реакцию.

Наблюдения:_________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Вывод: ______________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Необратимое осаждение

Опыт № 2 Осаждение белков при кипячении

Материалы и оборудование:яичный белок, 1% раствор; уксусная кислота – СH₃COOH, 1 % и 10 % растворы; Материалы и оборудование:орцин (5-метилрезорцин); концентрированная соляная кислота – HCl; хлорид железа (III) – FeCl₃, 10 % раствор;реактив Биаля (1 г орцина растворяют в 500 мл соляной кислоты и добавляют 1 мл раствора хлорид железа (III)); моча; ксилоза, 1 % раствор; штатив с пробирками; пипетка; водяная баня; электроплитка; пробиркодержатель.

Ход работы

1. В одну пробирку приливают 1 мл мочи, в другую – 1 мл ксилозы.

2. В обе пробирки добавляют по 5 мл реактива Биаля.

3. Нагревают до кипения.

Наблюдения:_________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Вывод: ______________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Ход работы

1. В 4-е пронумерованные пробирки приливают по 10 капель раствора яичного белка.

2. 1-ю пробирку нагревают до кипения.

3. Во 2-ю пробирку добавляют 1 каплю 1 % раствора уксусной кислоты и нагревают до кипения.

4. В 3-ю пробирку добавляют 1 каплю 10 % раствора уксусной кислоты и нагревают до кипения.

5. В 4-ю пробирку добавляют 1 каплю раствора гидроксида натрия и нагревают до кипения.

Наблюдения и выводы:

№ пробир-ки	Условие проведения, реактив	Наблюдаемые изменения	Вывод

Опыт № 3 Осаждение белков концентрированными минеральными (неорганическими) кислотами

Материалы и оборудование:яичный белок, 1% раствор; концентрированная серная кислота – H₂SO₄; концентрированная соляная кислота - HCl; концентрированная азотная кислота – HNO₃; штатив с пробирками, пипетка.

Ход работы

1. В 3-е пронумерованные пробирки приливают по 5 концентрированной серной, соляной азотной кислот.

2. Затем, наклонив каждую пробирку под углом 45 º, осторожно по стенке пробирки (так, чтобы жидкости не смешивались) наслаивают такой же объем раствора яичного белка.

3. Пробирки осторожно встряхивают.

Наблюдения:_________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Вывод: ______________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском по сайту: