Для чего используется исследование?

Химико-токсикологический анализ

Химико-токсикологическое исследование — это современный метод диагностики, позволяющий определить наличие в организме чужеродных веществ и их количество. Это могут быть различные яды, токсические вещества, медикаментозные препараты и т. д.

Химико-токсикологические исследования

Токсикологические исследования – это метод лабораторной диагностики, направленный на качественное и/или количественное определение чужеродных веществ в организме. К таким веществам относятся не только различные токсины и яды, а и, фактически, любые соединения, вводимые в организм извне.

Так, в частности, в фармакологии существует такое понятие, как токсикология лекарственных средств.

В более привычном смысле о токсикологических исследованиях речь идет в случае определения наркотических и психотропных веществ, алкоголя, сильнодействующих лекарственных препаратов, ядов.

Анализы разных биологических жидкостей организма (чаще всего – кровь и моча) на наличие токсинови их количество сегодня являются достаточно частым элементом лечебно-диагностического процесса.

Нельзя также не вспомнить о роли токсикологических исследований в судопроизводстве (в частности, для определения наличия и степени алкогольного либо наркотического опьянения).

Экспресс-методы применяются, когда есть необходимость лечения острых отравлений, требующих результаты в короткое время. Без них лечащий врач не может уточнить диагноз и принять все необходимые меры по обезвреживанию токсина или яда, а также улучшения состояния больного.

Объектами анализа могут быть:

Промывные воды желудка;

• Рвотные массы;
• Кровь;
• Моча человека.

Также эти анализы проводятся для выявления отрицательного воздействия лекарственных препаратов на организм человека. После этого могут быть приняты следующие решения:

• О возможности использования исследуемого химического соединения в качестве лекарственных средств (ЛС);
• Об ограничениях в использовании ЛС;
• О диапазоне их дозировки;
• О побочных эффектах.

Виды химико-токсикологических тестов

Проводятся следующие виды анализов:

· Исследование мочи «на вредные привычки». Анализ позволяет определить наличие никотина, алкоголя, психоактивных лекарственных препаратов и наркотиков

· Анализ на наличие в моче никотина и его метаболитов. Отдельный метод диагностики, направленный на выявление курения (в том числе и пассивного). Определяют наличие никотина, норникотина, котинина и анабазина

· Тест на фракцию трансферина. Позволяет выяснить, злоупотребляет ли пациент алкоголем

· Предварительный анализ мочи на выявление определённых наркотических веществ, сильнодействующих и психотропных препаратов. Позволяет обнаружить морфин, опиаты, героин, трамадон, амфетамины (и производные от них), бензодиазепины, барбитураты и наркотики из конопли

· Анализ крови на наличие летучих веществ — алкоголя и ацетона

· Аналогичный анализ мочи

· Анализ волос на сильнодействующие, психотропные и наркотические препараты

Трансферрин – сывороточный белок, главная функция которого – транспорт железа. В крови он присутствует в виде изоформ с различным количеством присоединенных остатков сиаловых кислот (в молекуле трансферрина их может быть до 8). В крови основной формой трансферрина является тетрасиалотрансферрин. При употреблении алкоголя в большом количестве гликозилирование трансферрина нарушается и в крови возрастает концентрация других его изоформ с меньшим количеством остатков сиаловых кислот (асиало-, моно-, дисиалотрансферринов).

Их и оценивают как суммарный углеводдефицитный трансферрин (CDT). Уровень карбонгидратдефицитного трансферрина значительно возрастает при ежедневном употреблении более 60 граммов этанола (4-5 алкогольных напитков или 0,75 литра вина в день) в течение не менее двух недель. При однократном приеме высоких доз спиртных напитков концентрация углеводно-дефицитного трансферрина в крови не изменяется. Период полувыведения трансферрина составляет 2 недели, поэтому после прекращения употребления алкоголя показатель нормализуется в вышеуказанный срок.

Специфичность CDT для диагностики хронического злоупотребления спиртными напитками составляет 80-90 %, чувствительность – 60-70 %. Исследование, выполненное с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), обладает значительным преимуществом перед иммунологическим методом в плане специфичности и чувствительности. CDT оценивается в относительных единицах (% от общего трансферрина), поэтому наличие анемии не влияет на результат анализа.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики хронического употребления высоких доз алкоголя;
• для оценки эффективности лечения алкоголизма;
• для мониторинга абстиненции в целях выявления рецидивов алкоголизма;
• для дифференциальной диагностики причин изменений функции печени, изменений поведения.

Надежность положительного или отрицательного ответа зависит от многочисленных факторов:
• давности и частоты потребления токсичного вещества (контакта с ним);
• пути попадания его в организм человека;
• возрастных, весовых, диетических, динамических, этнических, индивидуальных вариаций в поглощении, метаболизме и выведении ксенобиотиков; 
• состояния печеночной и почечной функций;
• pH и объема мочи;
• чувствительности и специфичности применяемого метода анализа;
• правильной организации получения, приема и хранения объектов исследования (биоматериала, объектов небиологического происхождения);
• продуманного и четкого документирования всего процесса работы;
• постоянного надзора за исправностью оборудования и чистотой всех реагентов;
• высокой профессиональной подготовкой персонала.

Каждую стадию химико-токсикологического анализа необходимо контролировать посредством:
• применения стандартного вещества сравнения;
• проверки правильности (калибровки проведенных операций);
• проверки воспроизводимости (статистической обработки);
• контроля условий анализа;
• моделирования.

Систематическая проверка необходима на самых уязвимых стадиях.
• Пробоотбор. Устраняют возможность уничтожения вещественных доказательств или фальсификации объекта, а также в связи с малой массой пробы, ее загрязнением или изменением химического состава под воздействием окружающей среды.
• Пробоподготовка (стадия оправданного риска частичной или даже полной потери определяемых веществ). Операция должна состоять из строгих и логически оправданных действий, направленных на сохранение определяемого вещества. Рекомендуют проведение экспрессных тест-анализов. На этой стадии только ограниченное количество методов позволяет провести анализ без предварительной подготовки, т. е. непосредственно в биоматериале и других объектах (иммунологические, химические и др.).

Для большинства методов стадии пробоподготовки и концентрирования обязательны. В настоящее время нет метода, с помощью которого в одной простой процедуре быстро обнаруживали бы и точно идентифицировали все встречаемые токсичные вещества при их низкой концентрации. Именно поэтому процесс обнаружения и идентификации проходит в два методических этапа: скрининговый (указательный) и подтверждающий (идентифицирующий).

Скрининговые тесты
Методы первого этапа должны обладать высокими производительностью и уровнем чувствительности, достаточно широким охватом классов токсичных соединений, но необязательно высокой специфичностью. На этом этапе важно получить минимум отрицательных ответов и максимум положительных, однако при таком методологическом подходе бывает значительное (10-15%) количество ложноположительных результатов. Второй этап — удаление (в идеале) ложноположительных результатов. Его методы часто менее производительны, но более высокоспецифичны. В практике химико-токсикологического анализа стандартными методами первого этапа являются тонкослойная хроматография и иммунологические методы исследования.

Тонкослойная хроматография - доступна, дешева, охватывает широкий диапазон разнообразных классов токсичных веществ, достаточно высокопроизводительна. К недостаткам тонкослойной хроматографии относят трудоемкость, работу с вредными веществами (растворителями), трудности в интерпретации результатов. Значительно большей чувствительностью обладает высокоэффективная тонкослойная хроматография.

Подтверждающие тесты
В аналитической токсикологии принято, что первичное обнаружение токсичного вещества должно быть подтверждено, если возможно, с помощью исследований, основанных на других физико-химических принципах. При некоторых обстоятельствах может быть приемлемо в качестве подтверждающего теста использование той же аналитической системы, что и при первичном исследовании, как, например, в газожидкостной хроматографии, если применяют химическую дериватизацию (силидирование или ацетилирование), ведущую к изменению времени удерживания. В то же время подтверждающий анализ с повторным использованием газожидкостной хроматографии системы с подобной, но не идентичной колонкой обычно непригоден, так как данные об относительном времени удерживания многих веществ не будут существенно различаться.

Повторное использование радиоиммунного анализа для подтверждения положительных результатов, полученных другим иммунным методом (в частности, поляризационным флюороиммунологическим анализом), не может быть принято как приемлемое. Исследуемые вещества в первом методе будут иметь те же самые перекрестные реакции, что и во втором, поскольку специфичные антитела могут реагировать на те же самые токсичные вещества или вещества, сходные с ними.

Иммунные методы обладают высокой чувствительностью, превосходящей чувствительность тонкослойной хроматографии (кроме высокоэффективной тонкослойной хроматографии), и более высокой специфичностью в отношении класса веществ, для которого они изготовлены. Они поддаются простой автоматизации. Иммунные методы явно превосходят ТСХ- скрининг в обнаружении токсичных веществ, потребляемых в миллиграммовых и субмиллиграммовых количествах (например, галлюциногенов). В случаях острых отравлений, летальных исходов, когда дозы токсичного вещества повышены из-за передозировки, ТСХ-скрининг — вполне удовлетворительный метод.

Недостатки иммунных методов:
• выпускаемые наборы (диагностикумы) в настоящее время еще слишком дороги для скринингового поиска:
• ассортимент диагностикумов достаточно ограничен;
• иммунные методы служат методом определения групповой принадлежности веществ;
• течение иммунной реакции может быть нарушено простой фальсификацией пробы.

Газовая хроматография с масс-спектрометрией— второй подтверждающий метод, в нем соединяются высокоэффективное хроматографическое разделение на капиллярных колонках и молекулярно-идентифицирующий высокочувствительный масс-спектрометр.

http://meddaily.info/?cat=article&id=969
Газожидкостная хроматография с плазменно-ионизационным детектором и высокоэффективная жидкостная хроматография — следующие по надежности подтверждающие методы. У этих методов более значительная разделительная сила, чем у тонкослойной хроматографии, обусловливающая их большую пригодность для подтверждения результатов, полученных методом тонкослойной хроматографии.

Иммуноферментный метод с различной перекрестной реактивностью может быть иногда повторно использован для аргументации первичного скрининга. Подтверждение результата в единичном экстракте одного и того же образца не рассматривают как приемлемое, поскольку это не исключает возможность загрязнения экстракта в процессе экстракции. Правильно — подтверждать идентичность обнаруженного вещества в различных экстрактах одной и той же пробы. Определение количественного содержания искомого вещества может быть одновременно и подтверждающим методом идентификации, если определяемое вещество было изначально обнаружено методом, значительно отличающимся от первого.

Для проверки идентификации того или иного токсичного вещества рекомендуют, если возможно, иметь несколько проб образца. Если имеется только одна проба, следует обязательно проводить повторное определение в разных случаях и с использованием адекватных контрольных положительных и отрицательных опытов на подобной матрице в образцах сходного типа. Использование подтверждающих методов идентификации рекомендуют в отношении всех видов токсичных веществ, включая этанол и оксид углерода.

Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском по сайту: