Идентификация выделенной чистой культуры по

Занятие № 2

ТЕМА: Микробиологическая диагностика стрептококковых инфекций

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ знать: классификацию и основные биологические свойства стрептококков, материал и методы микробиологической диагностики, этапы бактериологического метода диагностики стрептококковых инфекций

уметь: приготавливать мазки, окрашивать по Граму, микроскопировать препараты, определять морфологические и тинкториальные свойства, проводить бактериологические исследования гноя, фекалий, выделять чистую культуру стрептококков из исследуемого материала, определять факторы патогенности и чувствительность стрептококков к антибиотикам;

Задание на дом

1. Вопросы для самоподготовки:

Характеристика биологических свойств и особенности микробиологической диагностики стрептококковых инфекций

2. Контрольные вопросы:

1. Классификация стрептококков

2. Морфологические и тинкториальные свойства стрептококков

3. Культуральные свойства стрептококков

4. Биохимические свойства стрептококков

5. Биохимические различия патогенных и непатогенных стрептококков

6. Антигенные свойства стрептококков

7. Эпидемиология и основные инфекции, вызываемые патогенными стрептококками

8. Материал и методы диагностики стрептококковой инфекции

9.Этапы бактериологического метода диагностики стрептококковой инфекции

ПЛАН ИЗУЧЕНИЯ ТЕМЫ

I. План лабораторной работы:

Заполнить таблицу: «Биохимические свойства стрептококков»

2. Разобрать схему бактериологического метода при микробиологической диагностике инфекционных заболеваний:

Суть бактериологического метода: выделение чистой культуры предполагаемого возбудителя и ее идентификация, т.е. определение его видовой принадлежности.

Цель: получение изолированных колоний

I этап.

по Граму

37 t° 18-24часа

t°

исследуемый

материал

питательная

среда

II этап. Цель: накопление чистой культуры

 

37 t^o 18-24часа

t°

 

по Граму скошенный

агар

III этап. Цель: идентификация исследуемой культуры

И определение ее антибиотикограммы

t° t° t° t°

по Граму «Пестрый ряд» РА с диагностич. р-ция фаголизиса метод дисков

сыворотками

37 t ° 37 t ° 37 t ° 37 t °

IV этап.

Учет результатов. Выдача ответа Цель: идентификация исследуемой культуры(определение вида, биовара, серовара)

3. Методы диагностики стрептококковых инфекций:

__________________________________________________________________________________

Бактериологический метод диагностики стрептококковых инфекций

Цель: ____________________________________________________________________________

Материал:________________________________________________________________________

I этап

Ориентировочная бактериоскопия

Приготовить мазок из исследуемого материала, окрасить по Граму, микроскопировать

Морфологические свойства: форма_____________________
расположение_________________
Тинкториальные свойства____________________________

2. Посев на элективные среды с целью получения изолированных колоний с последующей инкубацией при t= 37° C в течение 18-24 ч.

II этап

1. Изучение культуральных свойств

Изучить культуральные свойства колоний, выросших на кровяной агаре

2. Приготовление мазка, окраска по Грамму, изучение морфологических и тинкториальных свойств: Грам+ кокки, в мазках могут располагаться, парами, короткими цепочками

3. Пересев на скошенный агар с целью накопления чистой культуры

III этап

Идентификация выделенной чистой культуры по

1. морфологическим и тинкториальным свойствам: _________________________________

__________________________________________________________________________________

2. культуральным свойствам: На кровяном МПА - колонии ____________________________

__________________________________________________________________________________; на сахарном бульоне - ______________________________________________________________

__________________________________________________________________________________;

желчно-эскулиновый агар при подозрении на энтерококки!

3. биохимическим свойствам. Посев изолированных колоний на ________________________

Постановка: ______________________________________________________________________

__________________________________________________________________________________.

Инкубация и t= __° C в течение _______________________________________________________

Учет реакции:расщепление углеводов (см. таблицу)

4. факторам патогенности (наличие CAMP-фактора, PYR-фермента, гемолизина и др.)

· CAMP-тест(большая часть стрептококков группы B (S.agalactiae) продуцирует экстрацеллюлярный протеин (CAMP-фактор), который при взаимодействии с бета-лизином золотистого стафилококка вызывает синергическое усиление лизиса эритроцитов).

Постановка: Через центр чашки с кровяным агаром сплошной линией наносят суточную бульонную культуру продуцирующего бета-лизин золотистого стафилококка. В контрольных чашках: S.agalactiae (+контроль) и S.pyogenes (-контроль). Чашки ставят в термостат при t= 37° C.

Учет реакциипроизводят через 18 ч. по обнаружению в месте пересечения посевов стрептококка и стафилококка зоны синергического увеличения гемолиза в виде «крыла бабочки».

· PYR-тест(обнаружение фермента пирролидонилариламидазы, PYR, образующегося большинством штаммовS.pyogenes)

Постановка:Исследуемую культуру стрептококка вносят петлей в небольшое количество питательного бульона, содержащего L-пирролидонил-бета-нафтиламид, ставят в термостат при t= 37° C.

Учет: через 4 часа в бульон добавляют 1 каплю диметиламиноацидамальдегида, в случае + реакции появляется ярко-красное окрашивание.

· Определение гемолизина

Постановка:______________________________________________________________________

Учет: _____________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском по сайту: