Сделай Сам Свою Работу на 5

Типы микроскопов и принципы микроскопии; правила работы с микроскопом при использовании иммерсионной системы





Микроскопический метод исследования - это изучение под микроскопом окрашенных препаратов из исследуемого материала:

 

предметный столик
тубус с револьвером для объективов
тубусодержатель
основание
штатив
окуляр
Винты для регулирования предметного столика
Конденсор и светофильтры
макровинт
Настройка света
Вкл\выкл
микровинт

Световой микроскоп состоит из:

Механической части Механическая часть обеспечивает крепление и движение. Она включает штатив, состоящий из основания и тубусодержателя; тубус с револьвером для объективов; предметный столик для препарата, а также приспособления для крепления конденсора и светофильтров. В штатив встроены механизмы грубого (макровинт) и тонкого (микровинт) перемещения тубусодержателя и пред- метного столика. Оптической части Оптическая часть представлена объективами, окулярами, конденсором и осветительной системой. Осветительный аппарат находится под предметным столиком: осветительная лампа, диафрагма (регулирует объем светового пучка), конденсор (в фокусе конденсора собираются параллельные лучи света). Объективное увеличение: - объективы «сухие» малого и большого увеличения (8х и 40х), - объективы иммерсионные (90х и 100х). Окулярное увеличение: - окуляры 7х, 10х, 15х.

 



Общее увеличение микроскопа равно произведению увеличения объектива на увеличение окуляра.

Разрешающая способность микроскопа определяется размером наименьшего объекта, который можно увидеть в данный микроскоп. Для световых микроскопов разрешающая способность – 0,2 мкм, для электронного - в 2000 раз выше.

 

Системы микроскопии

Сухая иммерсионная

-между объектом и объективом - между объектом и объективом-

находится воздух; жидкость (масло, вода);

- используется для изучения крупных - используется для изучения

биологических объектов (ботанических, микроорганизмов;

гистологических);

- максимальное увеличение объектива ´40 - увеличение объектива ´90;

 

Преимущества иммерсионной системы.Масляная системаза счет выравнивания показателей преломления света повышает уровень полезного увеличения микроскопа.



Фазово-контрастное устройство может быть установлено на любом микроскопе. Это система диафрагм, которая используется для превращения невосприимчивых человеческим глазом фазовых колебаний светового луча в амплитудные. Благодаря специ­альному приспособлению в объективе (фазовая пластинка) и в конденсоре (кольцевая диафрагма) эти объекты выглядят более темными (позитивный фазовый контраст) или более светлыми (негативный фазовый контраст) по сравнению с окружающей средой.

Темнопольная микроскопия.В основе лежит принцип рассеивания света мельчайшими взвешеннымичастицами в темном поле при боковом освещении (эффект Тиндаля). При темнопольной микроскопии в объектив попадают только лучи, рассеянные объектом, и не попадают прямые лучи от осветителя. Поэтому наблюдаемые микроорга­низмы кажутся ярко светящимися на темном фоне.

Темнопольную микроскопию применяют для прижизненного изучения лептоспир, спиро­хет, а также микроорганизмов слишком мелких, чтобы их можно было различить при обычном светлопольном освещении. Для темнопольной микроскопии используют обыч­ные объективы и специальные темнопольные конденсоры.

Люминесцентная микроскопия. Воснове лежит способность веществ и биологических объектов светиться при воздействии на них ультрафиолетовых лучей. Применяют специальные люминесцентные микроскопы или приспособления к обыч­ным микроскопам. Так как большинство микроорганизмов не обладает собственной люминесценцией, то их предварительно окрашивают (флюорохромируют) сильно разве­денными растворами специальных красителей (флюорохромы), которые связываются с определенными структурами клетки.



Люминесцентную микроскопию применяют также для выявления антигенов и антител. С этой целью используют метод иммунофлюоресценции (люминесцентно-серологический метод). Этот метод позволяет выявить в препарате микробы, содержащие определенные антигены. Для их обнаружения необходимо иметь антисыворотки, содержащие антитела к этим антигенам (к антисывороткам химическим путем присоединены молекулы флюоро-хромов - люминесцирующие сыворотки). На фиксированный препарат во влажной камере наносят люминесцирующую сыворотку, инкубируют, промывают раствором хлорида натрия, высушивают и рассматривают в люминесцентном микроскопе. Если в препарате есть микробы, содержащие антиген, антитела к которому были в люминесцирующей сыворотке, они ярко светятся. Остальные микробы не люминесцируют.

Электронная микроскопия.Изображение в электронном микроскопе образуется не с помощью световых лучей и стеклянных линз, а с помощью потока электронов, который фокусируется электрическим или магнитным полем. Разрешающая способность примерно в 2000 раз больше, чем светового (0,2 нм), и с его помощью можно увидеть даже крупные молеку­лы. Применение электронного микроскопа значительно расширило знания о вирусах, фагах и других микроорганизмах.

К работе № 3

 








Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском по сайту:



©2015 - 2024 stydopedia.ru Все материалы защищены законодательством РФ.