Типы микроскопов и принципы микроскопии; правила работы с микроскопом при использовании иммерсионной системы
Микроскопический метод исследования - это изучение под микроскопом окрашенных препаратов из исследуемого материала:
тубус с револьвером для объективов
| Винты для регулирования предметного столика
|
Световой микроскоп состоит из:
Механической части
Механическая часть обеспечивает крепление и движение.
Она включает штатив, состоящий
из основания и тубусодержателя;
тубус с револьвером для объективов;
предметный столик для препарата, а
также приспособления для крепления
конденсора и светофильтров.
В штатив встроены механизмы грубого
(макровинт) и тонкого (микровинт)
перемещения тубусодержателя и пред-
метного столика.
| Оптической части
Оптическая часть представлена объективами, окулярами, конденсором и осветительной системой.
Осветительный аппарат находится под предметным столиком: осветительная лампа,
диафрагма (регулирует объем светового пучка), конденсор (в фокусе конденсора собираются параллельные лучи света).
Объективное увеличение:
- объективы «сухие» малого и большого увеличения (8х и 40х),
- объективы иммерсионные (90х и 100х).
Окулярное увеличение:
- окуляры 7х, 10х, 15х.
|
Общее увеличение микроскопа равно произведению увеличения объектива на увеличение окуляра.
Разрешающая способность микроскопа определяется размером наименьшего объекта, который можно увидеть в данный микроскоп. Для световых микроскопов разрешающая способность – 0,2 мкм, для электронного - в 2000 раз выше.
Системы микроскопии
Сухая иммерсионная
-между объектом и объективом - между объектом и объективом-
находится воздух; жидкость (масло, вода);
- используется для изучения крупных - используется для изучения
биологических объектов (ботанических, микроорганизмов;
гистологических);
- максимальное увеличение объектива ´40 - увеличение объектива ´90;
Преимущества иммерсионной системы.Масляная системаза счет выравнивания показателей преломления света повышает уровень полезного увеличения микроскопа.
Фазово-контрастное устройство может быть установлено на любом микроскопе. Это система диафрагм, которая используется для превращения невосприимчивых человеческим глазом фазовых колебаний светового луча в амплитудные. Благодаря специальному приспособлению в объективе (фазовая пластинка) и в конденсоре (кольцевая диафрагма) эти объекты выглядят более темными (позитивный фазовый контраст) или более светлыми (негативный фазовый контраст) по сравнению с окружающей средой.
Темнопольная микроскопия.В основе лежит принцип рассеивания света мельчайшими взвешеннымичастицами в темном поле при боковом освещении (эффект Тиндаля). При темнопольной микроскопии в объектив попадают только лучи, рассеянные объектом, и не попадают прямые лучи от осветителя. Поэтому наблюдаемые микроорганизмы кажутся ярко светящимися на темном фоне.
Темнопольную микроскопию применяют для прижизненного изучения лептоспир, спирохет, а также микроорганизмов слишком мелких, чтобы их можно было различить при обычном светлопольном освещении. Для темнопольной микроскопии используют обычные объективы и специальные темнопольные конденсоры.
Люминесцентная микроскопия. Воснове лежит способность веществ и биологических объектов светиться при воздействии на них ультрафиолетовых лучей. Применяют специальные люминесцентные микроскопы или приспособления к обычным микроскопам. Так как большинство микроорганизмов не обладает собственной люминесценцией, то их предварительно окрашивают (флюорохромируют) сильно разведенными растворами специальных красителей (флюорохромы), которые связываются с определенными структурами клетки.
Люминесцентную микроскопию применяют также для выявления антигенов и антител. С этой целью используют метод иммунофлюоресценции (люминесцентно-серологический метод). Этот метод позволяет выявить в препарате микробы, содержащие определенные антигены. Для их обнаружения необходимо иметь антисыворотки, содержащие антитела к этим антигенам (к антисывороткам химическим путем присоединены молекулы флюоро-хромов - люминесцирующие сыворотки). На фиксированный препарат во влажной камере наносят люминесцирующую сыворотку, инкубируют, промывают раствором хлорида натрия, высушивают и рассматривают в люминесцентном микроскопе. Если в препарате есть микробы, содержащие антиген, антитела к которому были в люминесцирующей сыворотке, они ярко светятся. Остальные микробы не люминесцируют.
Электронная микроскопия.Изображение в электронном микроскопе образуется не с помощью световых лучей и стеклянных линз, а с помощью потока электронов, который фокусируется электрическим или магнитным полем. Разрешающая способность примерно в 2000 раз больше, чем светового (0,2 нм), и с его помощью можно увидеть даже крупные молекулы. Применение электронного микроскопа значительно расширило знания о вирусах, фагах и других микроорганизмах.
К работе № 3
Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском по сайту:
©2015 - 2024 stydopedia.ru Все материалы защищены законодательством РФ.
|