Для самоконтроля уровня знаний проанализируйте решения ситуационных задач: см. приложение 2.

Организация самостоятельной работы на занятии:

Входной тест

2. Практические работы:

Работа 1.Правила взятия крови у человека

Согласно Инструкции МЗ РФ о правилах забора крови у че­ловека, это следует делать только в стерильных условиях, однора­зовым скарификатором, с обязательной защитой рук человека, берущего кровь, одноразовыми перчатками. Чаще всего в услови­ях студенческого практикума сделать это невозможно, поэтому работают с консервированной кровью, полученной со станций переливания крови или взятой от экспериментального животного (кролик, крыса). Вместе с тем студент должен знать правила забора крови в лаборатории.

Для забора крови необходимы: одноразовый (стерильный) скарификатор, спирт, йод, стерильная вата, смесители, капилляр с резиновой грушей на конце, одноразовые резиновые перчатки.

Содержание работы: Наденьте перчатки. Проколите кожу (обычно 4-го, безымянного) пальца левой ("нерабочей") ру­ки испытуемого. Это делают потому, что 4-й палец имеет отде­ленное от других пальцев синовиальное влагалище, поэтому в слу­чае воспаления в зоне скарификации процесс не распространится на всю кисть.

Тщательно протрите палец ваткой, смоченной спиртом. Руку поместите на стол, слегка сжав подушечку пальца с двух сторон и быстрым движением проколите верхушку мякоти пальца скари­фикатором. Первую каплю снимите сухой ватой. Последующие капли обычно выступают сами, без надавливания. Если кровь свернулась и больше не идет, слегка помассируйте палец с боков в направлении от основания к верхушке, после чего вновь высту­пит капля крови. Получив крупную не растекающуюся каплю, правой рукой поднесите к ней капилляр, промытый цитратом на­трия, сначала под углом 45 °. По мере того как кровь поднимается в капилляр, меняйте его положение, опуская до горизонтального, а потом ещё несколько ниже. Следите, чтобы в капилляр не попали пузырьки воздуха. Если это произошло, выпустите кровь с пузырьком на сухую ватку, а затем снова наберите так, чтобы столбик крови был непрерывным. В зависимости от задачи кровь набирайте или в капилляры, или в меланжеры для эритроцитов и лейкоцитов. Закончив взятие крови, приложите к месту скарификации ватку с йодом.

Рекомендации к оформлению протокола: Запишите основные этапы взятия крови.

Работа 2. Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ)

Для работы необходимы: хирургические перчатки, прибор Панченкова, часовое стекло или тигелек, стерильный скарификатор, 5-6% раствор цитрата натрия, спирт, йод, ватные шарики.

Методика работы: Химически чистый капилляр прибора Паиченкова промыть рас­твором цитрата натрия, затем набрать его в капилляр до отметки 0,75 и выдуть раствор в тигелек. После этого набрать в капилляр кровь до отметки 0 (К) и смешать ее в тигельке с раствором. В результате получим соотношение крови и раствора цитрата натрия 4:1.

Полученную смесь набрать в капил­ляр до отметки 0 (К). Закрыв пальцем верхний конец капилляра, установить его строго вертикально в штативе Панченкова, упирая нижний конец в ре­зиновую прокладку. Через час отметить скорость оседания эритроцитов в мм по высоте столбика плазмы, освободившегося от эритроцитов.

Рекомендации к оформлению протокола. При оформлении протокола необходимо нарисовать в тетради прибор Панченкова. Обсуждая результа­ты работы, обоснуйте использование цитрата натрия в анализе; опишите биофизические механизмы оседания эритроцитов; факторы, влияющие на СОЭ. В выводах со­поставьте полученные данные с нормой, объясните несоответствия; укажите медицинское значение показателя СОЭ.

Работа 3. Определение количество гемоглобина в крови методом Сали.

Для работы необходимы: хирургические перчатки, гемометр Сали, капилляр Сали, стеклянная палочка, стерильный скарификатор, 0,1 Н раствор соляной кислоты, спирт, йод, ватные шарики.

Методика выполнения работы: Налить глазной пипеткой до нижней круговой метки градуированной пробирки гемометра 0,1 нормальный раствор соляной кислоты. Набрать капилляром Сали 20 мм³ исследуемой кро­ви. Снять ватным шариком кровь, находящуюся на внешней поверхности кончика капилляра, внести набранную кровь в градуированную пробирку, смешав её с соляной кислотой (натянуть несколько раз смесь с кислотой в капилляр, чтобы вся кровь попала в раствор). Тщательно размешать стеклянной палочкой смесь (для более полного гемолиза эритроцитов).

Через 5 мин об­разуется раствор соляно-кислого гематина темно-коричневого цвета. Довести цвет полученного раствора соляно-кислого гематина, добавляя глазной пипеткой дистиллированную воду. После добавления воды необходимо размешивать раствор стеклянной палочкой. Когда цвет исследуемого раствора станет таким же как цвет стандартных растворов (в запаянных пробирках гемометра) прочитать по шкале градуированной пробирки результат (по нижнему краю вогнутого мениска). Полученный результат будет показывать содержание гемоглобина в граммах на 100 мл крови. Окончательный результат необходимо выразить в г/л.

Рекомендации к оформлению протокола: При оформлении протокола нарисуйте в тетради гемометр Сали. Обсуждая результаты работы, покажите, почему для анализа используется соляная кислота; дайте функциональную характеристику различных видов и соединений гемоглобина. В выводах сравните полученные данные с нормой, объясните несоответствия; обоснуйте медицинское значение определения количества гемо­глобина в периферической крови человека.

Работа 4. Подсчет количества эритроцитов в крови при помощи камеры Горяева.

Для подсчета количества эритроцитов используется счетная камера Горяева. Она представляет собой толстое стекло, которое четырьмя поперечными желобками разделено на три узкие площадки. Средняя площадка ниже боковых на 0,1 мм и на этой площадке по обе стороны от поперечного желобка, делящего её на две части, нанесены сетки Горяева. Так как высота боковых площадок на 0,1 мм боль­ше средней, то, если к ним притереть покровное стекло, над сетками обра­зуются камеры глубиной в 0,1 мм. Каждая сетка Горяева состоит из 225 больших квадратов (15x15). Каждый третий квадрат разделен дополнительно попе­речными и продольными линиями на 16 маленьких квадратиков. Таких больших квадратов, разделенных на малые, в сетке 25. Сторона малого квадратика равняется 1/20 мм, площадь -1/20 ^. 1/20 = 1/400 мм². Объем столбика жидкости над каждым малым квадратиком равен 1/400 ^. 1/10 =1/4000 мм³. В этом объ­еме подсчитывают эритроциты. Для подсчета эритроцитов кровь разводят в 200 (или 100) раз.

Методика выполнения работы: 1. Обработать безымянный палец левой руки спиртом, проколоть скарификатором, снять ватным там­поном первую каплю крови. Выдавить вторую каплю крови и натянуть в капилляр смесителя (меланжера) крови до отметки 0,5. Не давая крови свернуться, быстро втянуть в капилляр 1 % раствор хлорида натрия до от­метки 101. Хорошо перемешать кровь с раствором в расширенной части смесителя и положить в лоток. 2. Приготовить камеру Горяева к работе. Для этого протереть камеру и покровное стекло спиртом, просушить, затем накрыть покровным стеклом так, чтобы его края располагались на боковых площадках, и притереть его, двигая с небольшим усилием вдоль площадок, до появле­ния радужных колец. 3. Аккуратно размешать раствор в смесителе, выпустить первые две капли крови на ватку и прикоснуться кончиком смесителя к краю притертого покровного стекла. В силу капил­лярности раствор заполнит камеру. Считать эритроциты при малом уве­личении с окуляром 15, объективом 20. 4. Сосчитать количество эритроцитов в 80 малых квадратах, т.е. в 5 больших, разделенных на 16 малых. Для полу­чения точного результата необходимо считать эритроциты, лежащие внутри, на верхней и левой границе маленького квадрата. При подсчете рекомендуется на листе бумаги нарисовать 5 больших квадратов, разделить их на 16 малых и в каждый квадрат вписать подсчитанное количество эритроцитов. После заполнения квадратов найти сумму эритроцитов в 5 больших квадратах и вычислить по формуле количество эритроцитов в 1 мм³ крови.

ФОРМУЛА ВЫЧИСЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА ЭРИТРОЦИТОВ:

где:

X - искомое число эритроцитов, Э - сумма эритроцитов в 80 малых квадратах, 80 - количество малых квадратов, 200 - разведение крови, 1/4000 - объем столбика жидкости над малым квадратом.

Рекомендации к оформлению протокола. При оформлении протоко­ла вписать в 80 малых квадратов найденное ко­личество эритроцитов. Сравнить результат исследований крови с нормой. При отклонении от нормы указать возможные причины данного несоответ­ствия.

Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском по сайту: